Electrophorèse d'ADN: Notes utiles sur l'électrophorèse d'ADN
Electrophorèse d'ADN: Notes utiles sur l'électrophorèse d'ADN!
Pour trier les molécules d'ADN par longueur, on utilise l'électrophorèse d'ADN. Des morceaux d’ADN sont suspendus dans un plateau de gel et soumis à un champ électrique, ce qui les fait migrer vers une extrémité du plateau. Avec une distance de l'électrode correspondant à la longueur du brin, l'ADN se sépare en bandes. La technique joue un rôle dans l'identification des gènes permettant de diagnostiquer une maladie et d'autres formes de recherche génétique.
L'ADN à étudier est divisé en brins individuels. L'ADN est mélangé avec un colorant ou un radio-isotope qui permettra d'identifier son emplacement dans le gel. Les brins individuels sont ensuite séparés les uns des autres par électrophorèse d'ADN.
En injectant le matériel génétique de séparation dans des puits, le processus commence. Ils sont coupés au bout d'une plaque de gel. Un champ électrique est ensuite appliqué à la plaque de gel. L'ADN qui est attiré par l'électrode positive a une charge électrique négative.
Le gel résiste à l'ADN en mouvement; les petites pièces ont plus de facilité à se déplacer à travers les pores du gel et se déplacent donc plus loin. La longueur d'un segment peut être très précisément déterminée par la distance. Un gel de polyacrylamide est utilisé pour les fragments courts à séparer. Pour les segments plus longs, un gel d'agarose est utilisé. L'agarose est fabriqué à partir d'algues, tandis que le polyacrylamide est un polymère synthétique. Les gels d'agarose sont beaucoup moins denses que les gels de Polyacrylamide et permettent aux molécules plus grosses de s'y déplacer.
Une méthode récemment développée, appelée électrophorèse sur gel en champ pulsé, doit être utilisée pour les très longs segments d'ADN. Ce processus utilise un champ électrique qui subit en permanence de subtils changements de direction pour maintenir les très longs brins correctement orientés lorsqu’ils se déplacent dans l’agarose.
L'électrophorèse sur gel peut être utilisée afin d'identifier la présence de brins d'ADN de longueur connue. Il peut donc être utilisé pour déterminer l’existence de certains traits ou maladies génétiques chez un individu donné.
L'électrophorèse de l'ADN peut également être utilisée pour isoler des brins d'ADN à recombiner dans le cadre d'un projet de génie génétique. Comme dans les tests de paternité ou la criminalistique judiciaire, l’ADN peut également être utilisé pour créer un profil génétique d’un individu à des fins d’identification.
